Sviluppu di un metudu ELISA indirettu per a rilevazione di l'anticorpu IgG di coronavirus di sindromu di diarrea acuta porcina basatu nantu à a proteina spike recombinante

U Coronavirus di Sindrome di Diarrea Acuta Porcina (SADS-CoV) hè un coronavirus patogenicu entericu porcinu di novu scupertu chì pò causà diarrea acquosa in i porcellini neonati è causa perdite ecunomiche significative à l'industria porcina.Attualmente, ùn ci hè micca un metudu serologicu adattatu per valutà l'efficacità di l'infezzione è di a vacuna SADS-CoV, per quessa, ci hè una necessità urgente d'utilizà un test immunosorbente enzimaticu (ELISA) efficace per cumpensà sta carenza.Quì, un plasmide recombinante chì esprime a proteina spike (S) SADS-CoV fusa cù u duminiu IgG Fc umanu hè statu custruitu per pruduce baculovirus recombinante è espresso in cellule HEK 293F.A proteina S-Fc hè purificata cù a resina di proteina G è mantene a reattività cù anticorpi anti-Fc umanu è anti-SADS-CoV.Allora a proteina S-Fc hè stata utilizata per sviluppà ELISA indiretta (S-iELISA) è ottimisà e cundizioni di reazione di S-iELISA.In u risultatu, analizendu u valore OD450nm di 40 sieri negativi SADS-CoV cunfirmati da immunofluorescence assay (IFA) è Western blotting, u valore cut-off hè statu determinatu per esse 0.3711.U coefficient of variation (CV) di i 6 sieri positivi SADS-CoV in è trà e runs di S-iELISA eranu tutti menu di 10%.A prova di reattività incruciata hà dimustratu chì S-iELISA ùn hà micca reattività incruciata cù altri serii di virus porcini.Inoltre, basatu annantu à a rilevazione di 111 campioni di serum clinicu, a rata di coincidenza generale di IFA è S-iELISA era 97,3%.A prova di neutralizazione di virus cù 7 diversi valori di OD450nm di serum hà dimustratu chì u valore OD450nm rilevatu da S-iELISA era correlatu positivamente cù a prova di neutralizazione di virus.Infine, S-iELISA hè stata realizata nantu à 300 campioni di serum di suini.I kits cummirciali di altri enterovirus porcini anu dimustratu chì i tassi positivi IgG di SADS-CoV, TGEV, PDCoV è PEDV eranu 81.7%, 54%, è 65.3%, rispettivamente., 6%, rispettivamente.I risultati mostranu chì u S-iELISA hè specificu, sensitivu è riproducibile, è pò esse usatu per detectà l'infezzione SADS-CoV in l'industria porcina.Stu articulu hè prutettu da copyright.tutti i diritti riservati.